Die Identifikation von Mikroorganismen spielt eine bedeutende Rolle bei der Behandlung von Krankheiten. Die mikroskopische Untersuchung eines gefärbten Abstrichs ist normalerweise der erste Schritt beim Nachweis und der Identifikation von krankheitserregenden Bakterien. Obwohl das Verfahren keine definitive Identifikation ermöglicht, liefert es wichtige Hinweise hinsichtlich der Größe, Form und strukturellen Zusammensetzung des Organismus. Färbungen sind entweder direkt oder indirekt. Wenn eine direkte Färbung verwendet wird, kann sie entweder einfach oder differenziert sein. Trotz seiner Einschränkungen hat die direkte Färbung zahlreiche Vorteile.
Abstrichpräparation
- Der erste Schritt bei direkten bakteriellen Färbungsverfahren ist die Präparation eines Abstrichs. Zellen aus einer Kultur oder einem Probe werden in einem dünnen Film über einen Glasobjektträger verteilt, getrocknet und mittels Hitze oder einem chemischen Fixativ fixiert. Das Fixieren des Abstrichs befestigt die Bakterien am Objektträger und verhindert, dass sie während des Färbungsverfahrens weggespült werden. Abstriche sollten dünn genug sein, um die Beobachtung einzelner Zellen zu ermöglichen, und ausreichend fixiert sein, um wiederholte Wäschen während des Färbungsverfahrens zuzulassen.
Färbungen
- Aufgrund ihres hohen Wassergehalts sind Mikroben fast farblos. Färbungen verbessern sie und offenbaren ihre verschiedenen Merkmale. Färbungen sind im Allgemeinen Salze, die aus geladenen Teilchen bestehen, sogenannten Ionen. Wenn sie mit Wasser gemischt werden, dissoziiert ein Salz in positiv geladene Kationen und negativ geladene Anionen. Färbungen sind Salze, bei denen entweder die Kationen oder die Anionen gefärbt sind. Je nachdem, welche Art von Ion die Farbe trägt, sind gängige mikrobiologische Färbungen entweder basisch oder sauer. Basische Färbungen enthalten gefärbte Kationen und farblose Anionen. Beispiele für basische Färbungen sind Methylenblau, basisches Fuchsin und Kristallviolett. Säure Färbungen haben gefärbte Anionen und farblose Kationen. Beispiele sind Eosin, Kongorot und Nigrosin.
Prinzip
- Bakterien tragen eine leichte netto negative Ladung. Folglich ziehen sie positiv geladene basische Färbungen an und binden sie. Da die Bakterien selbst den Farbstoff behalten, ist der Prozess eine direkte Färbungsmethode. Eine direkte Färbung kann entweder einfach oder differenziert sein. Einfache Färbung verwendet einen Farbstoff, um die Größe, Form und Anordnung von Bakterien zu offenbaren. Eine differenzierte Färbung, wie die Gram-Färbung, verwendet zwei unterschiedlich gefärbte basische Farbstoffe, um Arten von Bakterien zusätzlich zu ihren physikalischen Merkmalen zu unterscheiden. Indirekte oder negative Färbungstechniken verwenden säure Färbungen. Die Bakterien stoßen den Farbstoff ab und bleiben farblos gegenüber dem farbstoffhaltigen Hintergrund.
Vorteile
- Die direkte Färbung bakterieller Zellen ist die am häufigsten verwendete Technik zur Visualisierung von Bakterien. Sie ist kostengünstig, einfach und relativ schnell. Diese Technik bietet Gesundheitsfachkräften Ergebnisse am selben Tag, einen möglicherweise lebensrettenden Vorteil bei der Diagnose und Behandlung einiger Infektionen wie bakterieller Meningitis. Direkt gefärbte Abstriche sind permanente Präparate, die bei Bedarf zu einem späteren Zeitpunkt erneut untersucht werden können. Da die direkte Färbung die Bakterien abtötet, ist Ihr Infektionsrisiko durch die Handhabung des Abstrichs reduziert.
