HPLC-Kalibrierung: Ein umfassender Leitfaden für präzise Ergebnisse

Die HPLC (High-Performance Liquid Chromatography) ist ein Hochleistungs-Flüssigchromatographie-Test, bei dem Lösungsmittel unter hohem Druck von bis zu 400 Atmosphären durch eine Säule gepresst werden. Der hohe Druck ermöglicht schnellere Analysen als andere Chromatographieverfahren, wobei die Detektionsmethoden für HPLC automatisiert und empfindlich sind.

Für die HPLC ist eine Reihe von Kalibrierstandards erforderlich, die die spezifischen Verbindungen enthalten, die Sie testen möchten. Diese werden mithilfe einer Kalibrierkurve vorbereitet.

Benötigte Materialien

• HPLC-Säule
• Proben
• HPLC-Wasser
• Standards für Proben
• Volumenkolben
• Microsoft Word oder Excel

Anleitung

1. Bereiten Sie eine Reihe von Verdünnungen vor, um Kalibrierstandards mit den zu analysierenden Verbindungen herzustellen. Die Standards sollten einen Bereich von 20 Mikrogramm pro Milliliter bis 100 Mikrogramm pro Milliliter abdecken. Verwenden Sie hierfür Volumenkolben und HPLC-Wasser für die Verdünnungen. Wenn Sie beispielsweise Koffein analysieren, benötigen Sie einen Koffein-Standard, den Sie verdünnen, um eine Standardkurve zu erstellen.

2. Bereiten Sie die Probe vor, die Sie in der HPLC analysieren möchten. Wenn Sie beispielsweise Koffein analysieren möchten, können Sie Tee oder Kaffee wählen.

3. Verdünnen Sie die Probe mit HPLC-Wasser, sodass sie im Bereich Ihrer Standards liegt.

4. Injizieren Sie die Proben in die HPLC-Säule. Befolgen Sie die spezifischen Anweisungen des Herstellers für Ihre jeweilige Säule.

5. Erstellen Sie ein Diagramm der Daten Ihrer Standardlösungen mit der Peak-Fläche gegenüber der Probenkonzentration.

6. Bestimmen Sie die Konzentration jeder in Ihrer Probe enthaltenen Komponente anhand der von Ihnen erstellten Standardkurve.