Grundlagen der Durchflusszytometrie

Durchflusszytometrie Zellbiologie verbindet sich mit der Untersuchung von Lichtwellen . Wenn ein Lichtstrahl wird von einer Partikel prallte , streut das Licht in zwei Richtungen. Die Winkel von der Streulicht gemessen , und die Messdaten ein Bild von Objekten zwischen 0.5um bis 40um Durchmesser. Durchflusszytometrie -Metriken verwendet werden, um verschiedene Eigenschaften von biologischen Zellen , einschließlich Größe, Granularität , Zellrezeptoren und sogar biologische Aktivitäten , wie DNA und RNA -Replikation und -Synthese zu messen. Prozess

Durchflusszytometrie Techniken beginnen, indem sie eine Biopsie von Zellen und Weitergabe ein -by-one durch einen Lichtstrahl, der in einem Durchflusszytometer . Da die Zellen durch den Strahl passieren , werden die Lichtstreuungenund Messungen der feuerfesten Winkeln aufgenommen . Es wird in Verbindung mit einem Fluoreszenzmikroskop , das verwendet wird , um Komponenten einer Zelle durch Lichtemissionen von Fluoreszenzfarbstoffen bewerten geführt .
Flusskammer

Der Zweck der Strömungskammer ist als Trichter wirken, um sicherzustellen, dass die Zellen an den Lichtstrahl in einer einzigen Datei Leitung geliefert . Der Trichter wird mit einer Mantelflüssigkeit gefüllt ist, und es wird durch den Trichter mit den suspendierten Zellen geschoben . Der Trichter Breite beträgt typischerweise 10 Mikrometer, und die Flüssigkeit wird in eine Sammellinse , die verwendet wird , um das Licht zu streuen gedrückt.
Light Source

Obwohl die Mehrheit der Labore verwenden einen Laser , auch andere Lichtquellen einer Bogenlampe oder LED . Eine Lichtbogenlampe ist nicht in der Lage, Erfassungs schwächere Fluoreszenz, aber es kann mit der Technik , die stark fluoreszierende Emitter , wie z. B. die DNA-Analyse verwendet werden. In erster Linie ist die Lichtquelle ein Argon- Laser, der blaues Licht bei 488 Nanometern aussendet.
Immunologie

Durchflusszytometrie wird verwendet, um eine Reihe von Bedingungen in der Immunologie und Infektions messen . Die Durchflusszytometrie ist in der Diagnostik von HIV sowohl erbliche und erworbene Formen verwendet . Es wird auch verwendet , um Stufen von weißen Blutzellproliferation in Fällen von Lymphomen und Karzinomen messen. Darüber hinaus verwendet Immunologie Durchflusszytometrie , um die Ergebnisse der Knochenmarktransplantationspatientenzu messen.
DNA-Analyse

Durchflusszytometrie wird verwendet, um die Menge der DNA im Zellkern zu messen die Zelle . Durch Messen der DNA kann die spezifische Phase des Zellzykluszu identifizieren. Durchflusszytometrie können auch abnorme Anzahl von Chromosomen erkennen, um genetische Krankheiten zu identifizieren. DNA-Analyse mit Durchflusszytometrie wird auch zur Barrett-Ösophagus zu erkennen.