Erythrozyten- und Leukozytenzählung mit dem Thoma-Zählkammer: Warum Verdünnung wichtig ist

Genaue Blutzellzählung mit einer Zählkammer erfordert ordnungsgemäße Verdünnung — verwenden Sie niemals konzentriertes Blut. Konzentrierte Proben führen zu Zellüberlappung, Verklumpung und Zählfehlern. Standardverdünnungsverhältnisse sorgen dafür, dass Zellen gleichmäßig in der Zählkammer verteilt sind.

Erythrozytenzählung (RBC)

Verdünnung

• Standardverdünnung: 1:200 (1 Teil Blut + 199 Teile Verdünnungsmittel)
• Verdünnungsmittel: Hayem-Lösung, Gower-Lösung oder isotonische Kochsalzlösung mit Fixativ
• Nach Verdünnung gründlich mischen

Auftragen & Zählen

1. Deckglas auf die Zählkammer (Neubauer oder verbesserte Neubauer Kammer) legen.
2. Verdünnte Probe am Rand des Deckglases auftragen — Kapillarwirkung füllt die Kammer.
3. Zellen 1–2 Minuten setzen lassen.
4. Unter dem Mikroskop (10× Objektiv) RBCs in den 5 großen Eckquadraten zählen (jedes 1 mm², unterteilt in 16 kleine Quadrate).
5. Zählregeln anwenden: Zellen, die die oberen/linken Linien berühren, einschließen; solche, die die unteren/rechten Linien berühren, ausschließen.

Berechnung

RBC-Zählung (Zellen/µL) = (Gesamtzahl der in 5 Quadraten gezählten Zellen) × 10.000

Herleitung: Verdünnungsfaktor 200 × Kammer Tiefe 0,1 mm × Fläche 1 mm² × 5 Quadrate = 10.000

Leukozytenzählung (WBC)

Verdünnung

• Standardverdünnung: 1:20 (1 Teil Blut + 19 Teile Verdünnungsmittel)
• Verdünnungsmittel: Türk-Lösung (Essigsäure + Gentianviolett) lysiert RBCs und färbt WBC-Kerne

Auftragen & Zählen

1. Verdünnte Probe wie oben in die Zählkammer auftragen.
2. WBCs in den 4 großen Eckquadraten zählen (1 mm² jedes).
3. Zelltypen differenzieren, falls manuelles Differenzial durchgeführt wird (Neutrophile, Lymphozyten, Monozyten, Eosinophile, Basophile).

Berechnung

WBC-Zählung (Zellen/µL) = (Gesamtzahl der in 4 Quadraten gezählten Zellen) × 50

Herleitung: Verdünnungsfaktor 20 × Kammer Tiefe 0,1 mm × Fläche 1 mm² × 4 Quadrate = 50

Kritische Qualitätsaspekte

• Sauberes, trockenes Zählkammer- und Deckglas verwenden — keine Schmutzpartikel oder Kratzer.
• Richtiges Mischen vor dem Auftragen sicherstellen; Blasen vermeiden.
• Mindestens 100 Zellen pro Zelltyp für statistische Zuverlässigkeit zählen.
• Herstelleranweisungen und Labors SOPs befolgen.
• Automatisierte Analysatoren haben weitgehend manuelle Zählungen ersetzt, aber die Zählkammer-Methode bleibt die Referenzmethode für Validierung.