Während intensiver Bewegung, wenn der O₂-Bedarf das Angebot übersteigt, wechseln Muskelfasern zu anaerobischer Glykolyse. Pyruvat wird durch Laktatdehydrogenase zu Laktat (nicht Milchsäure – dissoziiert bei physiologischem pH) umgewandelt, wodurch NAD⁺ regeneriert wird, um die ATP-Produktion aufrechtzuerhalten.
Laktat selbst ist nicht die direkte Ursache der Ermüdung – es ist ein Brennstoff für Herz, Gehirn und oxidative Fasern. Die assoziierte Azidose und Pi sind die primären Ermüdungsmediatoren. Laktat klärt innerhalb von 30–60 Min nach der Bewegung durch Oxidation und Gluconeogenese (Cori-Zyklus) ab.
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