Dinitrosalicylsäure (DNSA): Anwendungen & Protokolle für die Zuckeranalyse

Dinitrosalicylsäure (D.N.S.A. oder 3:5-Dinitrosalicylsäure) ist ein Reagenz, das zur Bestimmung des Zuckergehalts, insbesondere von Glukose, verwendet wird. Die DNS-Technik wird angewendet, um den in Blut, Liquor cerebrospinalis und anderen menschlichen Körperflüssigkeiten vorhandenen Zucker zu schätzen. Sie wird auch effektiv bei der Handhabung von Anforderungen für diabetische Kliniken in Krankenhauslaboren verwendet, da nur 10 Minuten für den Prozess ausreichen und die Reagenzien stabil, billig und leicht herzustellen sind. Die Menge des Blutzuckers im Blut hat metabolische Implikationen und wird verwendet, um das Vorhandensein von blutzuckerbezogenen Störungen wie Hyperglykämie zu bestimmen. Eine gute Möglichkeit, den Blutzuckerspiegel zu beurteilen, ist die Verwendung von Dinitrosalicylsäure.

Anleitung

Platzieren Sie 17,5 g 3:5-Dinitrosalicylsäure in 1.000 ml heißem destilliertem Wasser (ca. 60 °C) und rühren Sie, um es aufzulösen. Filtern Sie die Lösung durch ein Filterpapier und einen Trichter und lagern Sie sie bei 25 °C. Dies wird später als Lee's Reagenz A bezeichnet. Bereiten Sie die Glukose-D.N.S.A.-Lösung vor, indem Sie 1 % Glukose in gesättigter Benzoesäurelösung zu 100 ml 1,75 % Lee's Reagenz A hinzufügen und gründlich mischen, indem Sie den verschlossenen Behälter wiederholt umdrehen. Lagern Sie bei 25 °C. Lösen Sie 13,8 g Phenol und 13,8 g Natriumbisulfit in 350 ml 10 %iger Natronlauge. Fügen Sie diese Lösung zu 510 g Kalium-Natrium-Tartrat in 180 ml Wasser hinzu. Filtern Sie die endgültige Lösung durch Filterpapier. Lagern Sie bei Raumtemperatur. Dies wird als Lee's Reagenz B dienen. Gewinnen Sie Blut aus einer Kapillarenpunktion mit gewöhnlichen 0,1- oder 0,2-ml-Pipetten. Die 0,1-ml-Pipette ist qualitativ genauer als die letztere bei der Messung von 0,1 ml Blut. Allerdings ist das Gegenteil der Fall bei der Messung von 0,2 ml Blut. Geben Sie das Blut in der Pipette in die Glukose-D.N.S.A.-Lösung in einem Reagenzglas. Mischen Sie es im Verhältnis 1:20. Bewegen Sie die Pipette auf und ab, bis Sie eine gleichmäßige Verteilung der Mischung zwischen dem Reagenzglas und der Pipette erhalten. Lassen Sie die Pipette in der Lösung und entfernen Sie das Niederschlag aus der Pipette, nachdem es sich ein oder zwei Stunden später gesetzt hat. Fügen Sie ein gleiches Volumen Lee's Reagenz B zum klaren Überstand hinzu. Erhitzen Sie danach in einem Wasserbad bei Sieden für nicht weniger als drei Minuten. Vergleichen Sie die entstandene rote Farbe mit einer, die von einer Standard-Glukoselösung erzeugt wird.