Biochemische Tests werden an den isolierten Bakterienkolonien durchgeführt, die aus der ursprünglichen Hühnchenprobe gewonnen wurden.
S. aureus produziert ein Enzym namens Katalase, das toxische Sauerstoffverbindungen wie Wasserstoffperoxid abbaut. Um festzustellen, ob Bakterien S. aureus sind, mischen Analysten einen Löffel der Bakterien von der Agarplatte mit Wasserstoffperoxid. Wenn Blasen entstehen, deutet dies auf das Vorhandensein von S. aureus hin.
Auch die Fähigkeit, Glukose ohne Sauerstoff abzubauen, ist ein Merkmal von S. aureus. Das Vorhandensein beider Merkmale deutet darauf hin, dass die Kolonien S. aureus sind.
S. aureus produziert das Koagulase-Enzym. Das Vorhandensein des Enzyms deutet stark darauf hin, dass die aus dem ersten speziellen Wachstumsschritt isolierten Bakterien S. aureus sind. Koagulase kann getestet werden, indem Bakterien mit einer kommerziellen Zubereitung von Fibrin gemischt werden, einem Protein, das zur Bildung von Blutgerinnseln verwendet wird. Ein positives Ergebnis tritt ein, wenn die Mischung zu einem Klumpen zusammenklebt.
S. aureus kommt häufig auf menschlicher Haut und in Lebensmitteln vor und kann mit Methoden wie der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) getestet werden, bei der die bakterielle DNA extrahiert und auf lesbare Mengen kopiert wird. Während ein solcher Test unter normalen Umständen prohibitiv teuer sein kann, ist DNA-Tests bei Ausbrüchen nützlich, wenn der Ursprung und die Verbreitung der Kontamination genau identifiziert werden müssen.

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