Alkalische Lyse Theorie

Wissenschaftler nutzen alkalischen Lyse von Plasmid-DNA aus Bakterien, die für den Einsatz in genetische Experimente zu extrahieren. Plasmide sind kleine, kreisförmige DNA-Moleküle , die ein kleines Stück des genetischen Codes für die Studie. Deshalb alkalische Lyse

Die alkalische Lyse -Protokoll besteht aus einer Reihe von Lösungen, die eine bakterielle Pellet, das Plasmid-DNA zugegeben. Die erhöhte Alkalität der Lösung verursacht Zellen platzen. Diese Methode der Extraktion schützt die Plasmid-DNA zerstören, während die genomische DNA und Denaturierung zellulärer Proteine ​​auf die Bereitstellung Wissenschaftler mit einem relativ reinen Probe.
SDS und NaOH

Alkaline beschreibt die zwei wichtige Chemikalien verwendet, um die Lyse von einzelnen Zellen zu bewirken. Sodium Dodecyl ( Lauryl )-Sulfat (SDS ) ist ein Reinigungsmittel , das die Zelle , indem sie Löcher in die Zellmembran destabilisiert. Natriumhydroxid (NaOH) fügt in den Abbau der Zellwand wodurch die Zelle in Lösung zerfallen und sein genetisches Material .
Warum Plasmid-DNA überlebt

Eine weitere Eigenschaft von NaOH in der alkalischen Lyse -Protokoll ist es, die Wasserstoffbrücken zwischen DNA-Basenpaare zu stören. Diese denaturiert genomischer DNA und Plasmid-DNA -Einzelstränge . Die Zugabe von Kaliumacetat zur Lösung neutralisiert die Alkalität und der kleine Plasmid-DNA in der Lage ist , wieder der Natur und in der Lösung aufzulösen . Genomische DNA zu groß ist , um erneut Natur seiner gesamten Länge . Es und die denaturierten Proteine ​​auszufällen während der Zentrifugation Verlassen der Plasmid-DNA in Lösung.