Safranin O ist eine chemische Substanz, die in der Molekularbiologie als Fleck oder Farbstoff verwendet wird. Dieser Farbstoff reagiert mit Knorpel, dem Gewebe, das Ohren, Nase und Gelenke bildet; bakteriellen Endosporen, immunabwehrenden Substanzen namens Granulat und einigen Proteinen wie Mucinen. Safranin-O-Protokolle umfassen Knorpelfärbung, Endosporenfärbung und dekalkifizierten Kondylus.
Knorpel-Färbeprotokoll
- Dieses Protokoll wird zur Erkennung von Knorpel, Mucinen, einer Art schwergewichtiges Protein, das in Hautgeweben produziert wird, und immunabwehrenden Mastzellgranulaten, die aus Heparin und Histamin bestehen, verwendet. Knorpelproben werden mit Formalin und Paraffin behandelt, berichtet IHC World. Techniker hydratisieren die Proben mit Wasser, färben mit Weigerts eisernem Hämatoxylin und spülen es ab. Dann färben sie die Proben mit Fast Green Farbstoff und spülen mit Essigsäure ab. Sie fügen 0,1 Prozent Safranin-O-Lösung hinzu. Nach fünf Minuten werden die Proben mit Ethylalkohol dehydriert. Die Mikroskopie zeigt Kerne in Schwarz und Zytoplasma in Grau-Grün. Knorpel, Mucin und Mastzellgranulat sind orange bis rot.
Endosporen-Färbeprotokoll
- Endosporen sind Strukturen, die in ruhenden oder vegetativen Bakterienzellen gebildet werden und als Überlebensmechanismus dienen, wenn die Organismen unter Stress stehen. Laut der American Society for Microbiology kann Safranin in Verbindung mit Malachitgrün-Farbstoff im Studium dieser vegetativen Zellen verwendet werden. Unter der Mikroskopie sind die Endosporen grün, während die vegetativen Zellen bräunlich-rot oder rosa sind. Vorgänge umfassen Hitzefixierung von Proben auf Objektträgern, Malachitgrün-Färbung unter einer Wärmequelle, Wasserwaschen der Proben und Färbung mit Safranin O in einer alkoholischen Lösung.
Dekalkifizierter-Kondylus-Protokoll
- Dieses Protokoll wird im Labor zur Studie der Dekalkifizierung von Gelenken oder Kondylen verwendet. Laut Yuehuei An im "Handbook of Histology Methods for Bone and Cartilage" wird Safranin O in einer wässrigen Lösung verwendet, um Knorpel und calciumfreie Bereiche zu färben. Techniker färben Kaninchen-Kondylus-Objektträger für 40 Minuten mit Safranin O, spülen in drei Ladungen destilliertem Wasser und tauchen die Proben für 30 Sekunden in eine alkoholische Lösung von Fast Green, gefolgt von einem kurzen Eintauchen in Essigsäure. Sie spülen die Proben mit Wasser und dehydrieren sie mit Ethanolalkohol. Eine Substanz namens Xylol wird vor der Mikroskopie hinzugefügt.
