Absorptionsmessungen mit Transmissionsspektrometern verstehen

Chemische Elemente und Mischungen weisen bestimmte Eigenschaften hinsichtlich der Fähigkeit auf, Licht für eine bestimmte Wellenlänge zu absorbieren. Absorptionsmessungen sind in verschiedenen Bereichen der Chemie und Molekularbiologie wertvoll, um Komponenten in einer Mischung zu identifizieren und ihre Menge zu bestimmen. Zum Beispiel wird die Konzentration von DNA bestimmt, indem die Lichtabsorption mit der 260-nm-Ultraviolettwellenlänge gemessen wird. Der Umkehrwert der Absorption ist die Lichttransmission, also die Menge an Licht, die durch eine Substanz hindurchtritt. Das Beer-Lambert-Gesetz stellt einen mathematischen Zusammenhang zwischen Transmission und Absorption her. Sie können das Beer-Lambert-Gesetz verwenden, um die Absorption aus Transmissionsdaten zu bestimmen.

Dinge, die Sie benötigen

• Wissenschaftlicher Taschenrechner
• Spektrometer

Anleitung

1. Messen Sie mit einem Spektrometer die Transmission der getesteten Substanz. Dieser Wert wird auf dem Transmissionsspektrometer angezeigt. Transmission ist definiert als das Verhältnis des durch die Substanz übertragenen Lichts (I) zur ursprünglichen Lichtintensität (Io), oder T = I / Io. Wenn die Anzeige des Spektrophotometer beispielsweise einen Wert von 50 % zeigt, entspricht dies 0,5 Transmission.

2. Berechnen Sie den Kehrwert der Transmission. Dieser Wert entspricht 1/T gleich Io/I. Mit dem Taschenrechner wird der Kehrwert berechnet als eins geteilt durch Transmission. Das Beispiel aus Schritt 1 wäre 1/0,5 = 2.

3. Berechnen Sie den Absorptionswert aus dem Kehrwert der Transmission unter Verwendung von LOG. Das Beer-Lambert-Gesetz beschreibt den Zusammenhang zwischen Absorption (A) und Transmission (I/Io) mit der Formel A = Log (Io/I), wobei Io/I gleich 1/T ist. Um die Absorption zu bestimmen, geben Sie den Wert für 1/T ein und drücken Sie die LOG-Taste. Das angegebene Beispiel wäre A = log 2 = 0,3 Absorptionseinheiten.