Zellstimulation: Protokolle, Reagenzien & Best Practices

Die Zellstimulation erfordert optimale Bedingungen unter Verwendung der richtigen Antigen-präsentierenden Zellen sowie der richtigen Reagenzien. Die üblicherweise aktivierten Zelltypen sind menschliche und murische T-Zellen sowie Antikörper.

Blutlymphozyten isolieren

Blut wird unter aseptischen Techniken gesammelt, mit pufferter Kochsalzlösung (PBS) verdünnt und mehrmals mit spezifischen Chemikalien wie HBSS-Lösung und RPMI 1640-Medium zentrifugiert. Die Zellen werden dann für die intrazelluläre Antikörperdetektion suspendiert.

Reagenzien zur Zellstimulation

Je nach Art des Zellstimulationsverfahrens werden spezifische Reagenzien verwendet, um die Zellproduktion anzuregen. Kits für spezifische Zellstimulationsexperimente können erworben werden. Die Kits enthalten die spezifischen Reagenzien, die für die Zellaktivierung benötigt werden. Nach dem Zellisolationsverfahren werden die für die Zellstimulation benötigten Reagenzien zur Zelllösung hinzugefügt und inkubiert.

Antigenfärbung

Antikörperkonjugat wird zur Zellsuspension hinzugefügt, um an Antigenen zu haften. Die Ergebnisse zeigen eine Färbung von Lymphozyten, die mittels Durchflusszytometrie untersucht werden.