Serienverdünnungen in der Mikrobiologie: Ein umfassender Leitfaden

Einleitung

Serienverdünnungen werden in biologischen und chemischen Laboren hauptsächlich zu experimentellen Zwecken verwendet. Diese Verdünnungen werden oft in logarithmischer Weise durchgeführt oder durch Faktoren von 10er-Potenzen vervollständigt. Meistens werden Bakterien, Zellen oder Lösungsstoffe verdünnt, um als Kontrollen in Experimenten zu dienen. Verdünnungen dienen als genaue Kontrolle, wenn sie in Dosis-Reaktions-Experimenten verwendet werden, da alle Proben aus derselben Charge stammen. Zudem können Verdünnungen notwendig sein, um die Anzahl der Partikel in einer Probe für den Einsatz in automatisierten Geräten zu reduzieren. Serienverdünnungen werden durchgeführt, indem ein kleines Volumen von der Originalprobe entnommen und in ein neues Gefäß gegeben und dann mit der Verdünnungslösung auf das ursprüngliche Volumen zurückgeführt wird. Die allgemeine Formel lautet: Originalkonzentration/Verdünnungsfaktor = neue Konzentration. Dieses Beispiel ist eine Serienverdünnung von 10 mL 2,5×10⁷ Zellen/mL auf 25 Zellen/mL durch eine Verdünnung von 100.

Benötigte Dinge

• Schutzbrille
• Handschuhe
• 10 mL 2,5×10⁷ Zellen/mL
• Drei Reagenzgläser à 100 mL
• Wachskreide
• 1-mL-Pipette
• 100-mL-Pipette

Anleitung

1. Setzen Sie Schutzbrillen auf und ziehen Sie Handschuhe an, bevor Sie mit Substanzen umgehen.

2. Beschriften Sie die drei Reagenzgläser mit der Wachskreide: 2,5 × 10⁵, 2,5 × 10³, 25 Zellen/mL.

3. Verwenden Sie die Formel: Originalkonzentration der Zellen/Verdünnungsfaktor = neue Konzentration, um die erste Verdünnung zu berechnen. Die Originalkonzentration beträgt 2,5 × 10⁷ und es liegt ein Verdünnungsfaktor von 100 vor für eine Endneukonzentration von 2,5 × 10⁵ Zellen/mL.

4. Verdünnen Sie die Originalprobe von 2,5 × 10⁷ Zellen/mL um den Faktor 100. Pipettieren Sie 1 mL der Originallösung in das Reagenzglas mit der Beschriftung „2,5 × 10⁵ Zellen/mL“. Pipettieren Sie zusätzliche 99 mL Wasser in das Reagenzglas, um die Verdünnung auf 2,5 × 10⁵ Zellen/mL zu vervollständigen.

5. Verdünnen Sie die Zellen um einen weiteren Faktor von 100. Pipettieren Sie 1 mL aus dem Reagenzglas mit 2,5 × 10⁵ Zellen/mL in das Reagenzglas mit der Beschriftung „2,5 × 10³ Zellen/mL“. Pipettieren Sie zusätzliche 99 mL Wasser in das Reagenzglas „2,5 × 10³ Zellen/mL“, um die Verdünnung auf 2,5 × 10³ Zellen/mL zu vervollständigen.

6. Verdünnen Sie die Zellen um den endgültigen Faktor von 100. Pipettieren Sie 1 mL aus dem Reagenzglas mit 2,5 × 10³ Zellen/mL in das Reagenzglas mit der Beschriftung „25 Zellen/mL“. Pipettieren Sie zusätzliche 99 mL Wasser in das Reagenzglas „25 Zellen/mL“, um die endgültige Verdünnung auf 25 Zellen/mL zu vervollständigen.