Gewebeschlitten-Präparation: Ein umfassender Leitfaden für Forscher und Fachkräfte

Die Vorbereitung von Gewebe für die mikroskopische Untersuchung ermöglicht Wissenschaftlern und Ärzten schnellen Zugang zu frisch gewonnenen Informationen von Tieren und Menschen gleichermaßen. In der Welt der medizinischen Forschung ist dieser Prozess entscheidend, da er einen Schnappschuss davon liefert, was tatsächlich passiert, kurz nachdem das Gewebe aus dem Organismus oder Körper entfernt wurde. Es gibt bestimmte Schritte, die befolgt werden müssen, um die Integrität des zu präparierenden Schlittens zu erhalten und zu verhindern, dass er ruiniert und unbrauchbar wird.

Was Sie benötigen

• 2 Becherglas mit niedriger Form, 250 mL
• Flüssiger Stickstoff
• Trockeneis
• Basisform (abziehbar)
• Gefrorenes Gewebematrix
• Pinzette
• Phosphatgepufferte Kochsalzlösung
• Laborreinigungstuch
• 2 Petrischalen

Anleitung

1. Füllen Sie eines Ihrer 250-mL-Bechergläser mit flüssigem Stickstoff (100 mL) und stellen Sie eine ähnliche Menge Trockeneis in das andere Becherglas und legen Sie es beiseite. Während die beiden Bechergläser stehen, geben Sie gefrorenes Gewebematrix in Ihre Basisform und legen es beiseite.

2. Nehmen Sie mit einer Pinzette Ihr Gewebe und legen Sie es in kalte phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS), um alles Blut zu entfernen.

3. Legen Sie das Gewebe in eine saubere, trockene Petrischale und stellen Sie sicher, dass es flach liegt. Legen Sie ein Labortuch darauf, um überschüssiges Blut aufzusaugen, das nicht im PBS-Bad entfernt wurde, und entfernen Sie es, wenn die Absorption abgeschlossen ist.

4. Übertragen Sie das Gewebe in die Formen der gefrorenen Gewebematrix in der Nähe des Bodens, und stellen Sie erneut sicher, dass Sie es flach ablegen.

5. Halten Sie mit einer Pinzette den Rand der Basisform fest und entfernen Sie sie aus dem Behälter, indem Sie sie in das Becherglas mit flüssigem Stickstoff legen. Nur der Boden der Form sollte die Oberflächenschicht des flüssigen Stickstoffs berühren und nicht länger als 30 Sekunden berühren.

6. Entfernen Sie das Gewebe aus dem flüssigen Stickstoff und legen Sie es auf das Trockeneis im anderen 250-mL-Becherglas. Es kann dann bei minus 80 Grad Celsius im Gefrierschrank gelagert werden, bis mit dem Schneiden begonnen werden soll.