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Pufferlösungen & Protokolle: Ein Leitfaden für Labore

Puffer bezieht sich auf Lösungen, die Veränderungen des pH-Werts oder der Säure widerstehen, wenn kleine Mengen einer Säure oder einer alkalischen Verbindung zu ihnen hinzugefügt werden. Pufferprotokolle sind technische Verfahren, die in chemischen und biologischen Laboren für wissenschaftliche Forschung verwendet werden. Protokolle für Puffer umfassen Citratpuffer-Antigenrückgewinnung, phosphatgepufferte Kochsalzlösung und Polymerase-Kettenreaktionspuffer.

Citratpuffer-Antigenrückgewinnung

  • Natriumcitrat oder Zitronensäure werden in diesem Protokoll als Puffer während Labortests verwendet, um bestimmte Proteine namens Antigene zu erkennen. Techniker erhitzen ein Wasserbad vor, stellen ein Färbeglas mit Natriumcitrat oder Citrat in das Bad und warten, bis die Temperatur 212 Grad Fahrenheit erreicht. Später tauchen sie Objektträger mit Gewebeproben in das Färbeglas ein und inkubieren für 40 Minuten. Die Objektträger werden dann mit PBS-Tween-Detergent gespült. Schließlich werden Objektträger für mindestens eine Stunde bei Raumtemperatur mit Antigenen inkubiert, berichtet Rocky Tuan in "Developmental Biology Protocols."

Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)

  • Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS) ist eine Pufferslösung, die oft in der biologischen Forschung verwendet wird. Das PBS-Protokoll besteht aus der Mischung von Disodiumphosphat (Na2HPO4), Natriumdihydrogenphosphat (NaH2PO4), Natriumchlorid und destilliertem Wasser. Der pH-Wert dieser Lösung sollte einen Wert von 7,4 erreichen, leicht über neutral.

Polymerase-Kettenreaktion

  • Das Pufferprotokoll der Polymerase-Kettenreaktion (PCR) verwendet die chemischen Verbindungen Kaliumchlorid (KCl), Tris-Hydroxymethyl-Aminomethan, allgemein als Tris bezeichnet, und Magnesiumchlorid (MgCl2). Dieses Protokoll wird bei der Analyse von Enzymen wie Polymerase verwendet. PCR-Pufferlösungen sind kommerziell in verschiedenen Konzentrationen erhältlich, laut dem Labor für Mikrobielle Ökologie der Universität von Toledo.

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