Säurefeste Färbung bei Tuberkulose: Ziehl-Neelsen-Methode und Interpretation

Säurefeste Bazillen (AFB) behalten Karbolfuchsin nach der Entfärbung mit Säure-Alkohol aufgrund ihrer mycolsäurereichen Zellwände bei – ein Merkmal des Mycobacterium tuberculosis-Komplexes.

Ziehl-Neelsen (ZN) Verfahren

1. Sputumausstrich auf Objektträger; an der Luft trocknen, hitze fixieren.
2. Mit Karbolfuchsin überfluten; sanft erhitzen (Dampf) 5 Minuten.
3. Abspülen; entfärben mit 3 % HCl in 95 % Ethanol, bis rosa.
4. Gegenfärbung mit Methylenblau 30 Sekunden.
5. Abspülen, trocknen, unter 1000× Ölimmersion untersuchen.

Interpretation

• AFB positiv: Rote Stäbchen auf blauem Hintergrund. Menge angeben (WHO/IUATLD-Skala: 1+ bis 3+).
• Sensitivität: ~50–60 % für kulturpositive TB (benötigt 10⁴ Bazillen/mL).
• Spezifität: Hoch für Mykobakterien; Nocardia teilweise säurefest (schwach).

Moderne Alternativen

• Fluoreszenzmikroskopie (Auramin-Rhodamin): Höhere Sensitivität, schnelleres Screening.
• Xpert MTB/RIF Ultra (GeneXpert): Automatisierter NAAT; erkennt M. tb + Rifampin-Resistenz in 2 Stunden; WHO-empfohlener Ersttest.
• Kultur (LJ, MGIT): Goldstandard; 2–6 Wochen; ermöglicht DST.

Diagnostischer Algorithmus

Verdacht auf TB → Xpert Ultra → bei positivem Befund behandeln; bei negativem Befund aber hohem Verdacht → Kultur + klinische Beurteilung. AFB-Ausstrich wird weiterhin eingesetzt, wo NAAT nicht verfügbar ist.