XTT-Zellvitalitäts-Assay-Protokoll: Genau & zuverlässige Zellgesundheitsbewertung

Das XTT-Zellvitalitäts-Assay-Protokoll bietet eine sichere, einfache Möglichkeit, die Menge der lebenden Zellen zu bestimmen, indem in Mikrotiterplatten die zelluläre Reaktion auf externe Faktoren gemessen wird. Das XTT-Protokoll ist der Verabreichung des MTT-Protokolls vorzuziehen, da es die Verwendung von Thymidin, einem radioaktiven Material, eliminiert und zuverlässige Ergebnisse liefert, die leicht reproduzierbar sind.

Chemische Reaktion

Das XTT-Protokoll verwendet Tetrazoliumsalze zur Untersuchung von Zellproliferation, Zellvitalität und Zytotoxizität. Das XTT-Protokoll ermöglicht eine schnelle Zellbestimmung in Mikrotiterplatten. Die Spaltung des Tetrazoliums zu Formazan ergibt sich aus der Reaktion des Tetrazoliumreduktase-Systems in den Mitochondrien metabolisch aktiver Zellen.

Komponenten des XTT-Protokolls

Die Verabreichung des XTT-Protokolls erfordert die Anwesenheit von drei Testkomponenten: dem XTT-Reagenz, dem XTT-Aktivator und der XTT-Arbeitslösung. Das XTT-Reagenz muss unter 20 Grad Celsius gelagert werden. Das XTT-Reagenz kann während der Lagerung ausfallen und muss vor Gebrauch auf 37 Grad Celsius erhitzt werden. Der XTT-Aktivator muss bei Temperaturen unter 20 Grad Celsius gelagert werden und muss auf 37 Grad Celsius erhitzt werden, bis er vollständig gelöst ist. Vor dem Test muss die XTT-Arbeitslösung vorbereitet werden, indem 5 mL XTT-Reagenz mit 100 µL XTT-Aktivator gemischt werden.

Vorteile des XTT-Protokolls

Es gibt mehrere Vorteile bei der Verabreichung des XTT-Protokolls anstelle der radioaktiven Markierung der zellulären DNA mit Thymidin. Das XTT-Protokoll ist empfindlicher und eliminiert die Verwendung radioaktiver Materialien. Das XTT-Protokoll kann schnell durchgeführt werden, ohne Zellstabilisierungsschritte zu erfordern, und wird für Hochdurchsatz-Assays empfohlen, wodurch Zellverlust und Zellvariation in den Ergebnissen reduziert werden.