Der Molisch-Test ist ein empfindlicher, allgemeiner qualitativer Nachweis für Kohlenhydrate (Monosaccharide, Disaccharide, Polysaccharide, Glykoproteine).
Chemisches Prinzip
- Dehydrierung: Conc. H₂SO₄ entfernt H₂O aus dem Kohlenhydrat → Furfural (Pentosen) oder 5-Hydroxymethylfurfural (Hexosen).
- Kondensation: Furfural-Derivate reagieren mit α-Naphthol (1 % in Ethanol) → purpurnes/violettes zyklisches Produkt (Molischs Chromogen) an der Flüssiggrenze.
Durchführung
- 2 mL Testlösung (oder Suspension) in einem sauberen Reagenzglas.
- 2–3 Tropfen α-Naphthol-Lösung hinzufügen; vorsichtig mischen.
- Glas neigen; 1–2 mL conc. H₂SO₄ langsam an der Wand hinabgießen, um eine deutlich untere Schicht zu bilden. Nicht mischen.
- Die Grenzfläche sofort beobachten.
Auswertung
- Positiv: Purpurner/violetter Ring an der Grenzfläche innerhalb weniger Sekunden. Intensität ∝ Kohlenhydratkonzentration.
- Negativ: Keine Farbänderung (oder nur Gelb/Braun durch Verkohlung).
Empfindlichkeit und Einschränkungen
- Nachweist ~1–5 µg Kohlenhydrat.
- Falsch-positiv: Einige Nicht-Kohlenhydrate (Glycerin, Milchsäure, bestimmte Aminosäuren) ergeben schwache Farbe.
- Unterscheidet nicht die Kohlenhydratart; anschließend spezifische Tests (Benedict's, Barfoed's, Seliwanoff's, Bial's, Iod).
- Conc. H₂SO₄-Gefahr: ätzend, exotherm; PSA tragen, Säure ins Glas (nicht Wasser in Säure).
Anwendungen
Screening auf Kohlenhydrate in unbekannten Proben, Lebensmittelanalyse, biochemische Fraktionen, Pflanzenextrakte.
