Mikrosomen-Präparation
Das Innere einer Zelle ist enorm komplex. Neben dem Zellkern gibt es eine Masse von Membranen – dem endoplasmatischen Retikulum – das alle Stoffwechselfunktionen übernimmt. Wissenschaftler fanden heraus, dass das Öffnen von Zellen Mikrosomen produziert – kleine Vesikel aus dem endoplasmatischen Retikulum.
Methoden
- Wissenschaftler verwenden eine Vielzahl von Methoden, um Zellen aufzubrechen: Sonikatoren, Gefrier-Tau-Zyklen, Homogenisatoren, Reinigungsmittel und für größere Proben Mixer. Sie zentrifugieren diese Suspension bei niedriger Geschwindigkeit, um die größeren Stücke zu pelletieren – Zellkerne und ungebrochene Zellen – und dieses Pellet wird verworfen. Die verbleibende Suspension wird bei hoher Geschwindigkeit zentrifugiert, um die Mikrosomen zu pelletieren – diese werden in einem Puffermedium für den Gebrauch wiederaufgelöst.
Erwägungen
- Der Wissenschaftler sollte eine Reihe von Punkten berücksichtigen, bevor er beginnt. Erstens wäre der Zelltyp – zum Beispiel sollte Leber perfundiert werden, um verunreinigendes Blut zu entfernen. Zweitens können Moleküle, die untersucht werden sollen, eine bestimmte Temperatur für Stabilität erfordern. Drittens können Mikrosomen in verschiedene Größen getrennt werden, daher kann die Zentrifugationsgeschwindigkeit kritisch sein, um den gewünschten Bruchteil zu erhalten.
Verwendungen
- Forscher verwenden Mikrosomen, um charakteristische Stoffwechselwege verschiedener Zelltypen zu identifizieren und zu definieren. Da jedoch die Leber die Stoffwechselstelle bei Tieren ist, verwenden Wissenschaftler – insbesondere in der Pharmaindustrie – Lebermikrosomen, um den Arzneimittelstoffwechsel zu untersuchen.
