Gram-Färbung verstehen: Bestandteile und ihre Rolle in der medizinischen Diagnostik

Die Gram-Färbung, die 1884 von einem niederländischen Mikrobiologen entwickelt wurde, ist ein medizinischer Test, der zur Unterscheidung zwischen zwei verschiedenen Lungenerkrankungen verwendet wird. Der Test betrachtet die Zellen in der Lunge und bestimmt, welche Art von Bakterien vorhanden ist, basierend auf den Reaktionen auf bestimmte Komponenten, die in das Gewebe injiziert werden.

Violetter Farbstoff

Die erste Komponente, die zu einem Gram-Färbung-Labor hinzugefügt wird, ist die Primärfärbung. Diese Färbung ist typischerweise eine Art violetter Farbstoff, wie Kristall-, Methyl- oder Genetianviolett. Der Zweck dieses Farbstoffs ist es, die Farbe der Bakterienzellen zu verändern. Diese Komponente wird jedoch nicht allein verwendet. Nachdem diese Komponente den Zellen hinzugefügt wurde, muss auch die zweite Komponente hinzugefügt werden, bevor vorläufige Beobachtungen gemacht werden. Ohne die zweite Komponente färbt der Farbstoff die Zellen weniger wahrscheinlich.

Jod

Gleichzeitig, wenn der Farbstoff den Zellen hinzugefügt wird, fügt der Labortechniker auch Jod zu der Mischung hinzu. Das Jod wirkt zusammen mit dem violetten Farbstoff, um einen stärkeren Halt auf den Zellen zu erzeugen, die die Farbe behalten. In diesem Stadium des Tests erwerben alle Zellen die violett-braune Farbe der Jod-Violett-Mischung. Zu diesem Zeitpunkt gibt es wenig Unterscheidung zwischen einem positiven und einem negativen Test.

Ethylalkohol oder Aceton

Nachdem die Zellen mit der Kombination aus violettem Farbstoff und Jod gefärbt wurden, werden Ethylalkohol, Aceton oder eine Kombination aus beiden hinzugefügt, um die Zellen zu entfärben. Bei Zellen, die negativ sind, löst die Entfärbungslösung die äußere Fettschicht der Zellen auf. Da nur die äußere Schicht aller Zellen den Farbstoff aufnimmt, werden alle negativen Zellen mit dieser Lösung von der Farbe gewaschen. Allerdings behalten gram-positive Zellen ihre violett-braune Farbe, weil die Lösung die Zellen dehydriert und die Poren schließt, durch die der Farbstoff entweichen kann.

Kontrastfärbung

Verschiedene Labore verwenden verschiedene Arten von Kontrastfärbung als letzte Komponente eines Gram-Färbungstests. Einige Labore verwenden Fuchsin, während andere Safranin verwenden. Allerdings erzeugt Fuchsin eine dunklere, leichter zu sehende Farbe und wird oft bevorzugt. Der Zweck dieses zweiten Farbstoffs ist es, alle negativen Zellen zu einer rosa Farbe zu färben anstatt der violett-braunen Farbe der Jod-Violett-Kombination. Dies hilft dem Labortechniker, die Unterschiede zwischen den beiden Zelltypen deutlich zu sehen. Sobald der Labortechniker die Kontrastfärbung verabreicht hat, kann er zwischen den beiden Zellen unterscheiden sowie Größe und Form deutlich sehen.