Western Blot Nachweismethoden

Da die Zahl der HIV-und Aids-Fälle stieg weltweit , die Notwendigkeit für eine genaue HIV-Tests wurde von wesentlicher Bedeutung. Jetzt, nach positiven ELISA- HIV-Tests , medizinische Fachkräfte mit einem Western-Blot- Test , einen positiven HIV-Infektion zu bestätigen. Ärzte diagnostizieren Lyme-Borreliose durch Western-Blot- Test als gut. Der Test verwendet komplizierten Nachweisverfahren : medizinische Arbeiter müssen Blutproben aus einem Gel auf eine Membran übertragen, um den Erkennungsprozess zu erleichtern. Tatsächlich Antikörper in der Membran zu erkennen , Arbeiter verwenden spezifische Enzyme, Substrate und /oder Fluorophore . AP Enzym

Alkalische Phosphatase (AP) ist eine der primären Enzyme im Western-Blot- Tests. AP eine lineare Reaktionszeit , wodurch sie einen Vorteil gegenüber anderen Nachweisenzyme . Je mehr Zeit ein AP -Reaktion zu erfolgen hat , desto genauer ist die Test . Allerdings kann die längere Frist abholen anderen chemischen Verbindungen und "Hintergrund"- Geräusche, die die Ergebnisse des Tests verzerren können .
HRP -Enzym

Medizinische Arbeitskräfte betrachten Meerrettich Peroxidase (HRP) überlegen AP, durch HRP kleineren Größe, hohe Erwerbsquote , die Kompatibilität mit der Reaktionsmembran , Zuverlässigkeit, günstige Preise und weit verbreitete Verfügbarkeit .
Chromogene Substrate

Medizinische Fachleute betrachten chromogene Substrate besten für die Anzeige der Innenmembran - Reaktion von Blut-und -Enzym. Chromogene Substrate sind nicht so empfindlich wie andere Substrate und neigen dazu , zu verschwinden , wie der Fleck getrocknet ist. Aber für eine schnelle visuelle Prüfung Bestätigung , chromogene Substrate einen wirksamen Wahl.
Chemiluminescent Blotting Substrate

Chemiluminescent Blotting Substrate erfordern eine konstante Reaktions für eine erfolgreiche Prüfung. Wenn das Enzym seine Tätigkeit oder das Substrat aufgebraucht ist , wird das Testergebnis verloren. , In optimaler Test wird jedoch das Testergebnis in einer bis 24 Stunden. Medizinische Arbeitskräfte nutzen digitale Imaging-Geräte oder Röntgenstrahlen , tatsächlich sehen das Testergebnis , weil die mit bloßem Auge nicht erkennen kann .
Fluorophore

Wenn medizinische Arbeitnehmer nicht testen mit Enzymen und ihre jeweiligen Substrate , dann nutzen Fluorophor - konjugierten Antikörpern. Der Fluorophor Test erfordert weniger Schritte benötigt aber spezielle Ausrüstung. Der Test erfordert eine Anregungslichtquelle , die die richtige Reaktion in der Membran bewirkt . Fluorophore und die Beleuchtungsanlagen sind teuer, aber medizinische Arbeitnehmer haben den Vorteil der Verwendung mehrerer Fluorophore im gleichen Experiment .