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Bakterien sind überall zu finden und leicht zu sammeln und zu züchten. Die häufigste Methode zum Züchten von Bakterien ist in Petrischalen mit Agar. Agar enthält Nährstoffe, die Mikroorganismen wie Bakterien ermöglichen, in großen Mengen zu wachsen. Dies hilft dem Wissenschaftler oder Studenten, die Anzahl und Art der Kulturen auf der Agarplatte zu sehen.
Ziehen Sie Ihre Schutzhandschuhe an. Nehmen Sie die Inokulationsschlinge und das Stück Obst.
Schalten Sie den Bunsenbrenner ein und halten Sie die Inokulationsschlinge über die Flamme. Stellen Sie sicher, dass die Schlinge rot glüht, um alle bereits auf der Schlinge vorhandenen Bakterien abzutöten.
Nehmen Sie die Inokulationsschlinge und reiben Sie sie am Obst ab. Öffnen Sie sofort eine frische Petrischale mit Agar und streifen Sie die Schlinge über das Agar. Nach dem Streifen halten Sie die Schlinge erneut über die Flamme, um alle Bakterien zu entfernen. Setzen Sie den Deckel auf die Petrischale.
Wiederholen Sie diese Schritte für zwei zusätzliche Agarplatten. Sie möchten mehr als eine Platte haben, um Ihre Ergebnisse zu vergleichen.
Stellen Sie die Agarplatten für 48 Stunden in einen 37-Grad-Celsius-Inkubator.
Nehmen Sie die Platten aus dem Inkubator und notieren Sie die Anzahl, Farbe und Form der Kolonien, die sich auf den Agarplatten gebildet haben. Konsultieren Sie eine Bakterienidentifikationstabelle oder ein Buch, um die Art der Kolonie zu bestimmen.
Nehmen Sie die Inokulationsschlinge, halten Sie sie über die Flamme des Bunsenbrenners und streichen Sie sie über eine der Kolonien auf Ihren Agarplatten. Verteilen Sie die Schlinge über einen Objektträger. Geben Sie einen Tropfen destilliertes Wasser auf den Objektträger und lassen Sie den Objektträger trocknen. Halten Sie den Objektträger kurz über die Flamme des Bunsenbrenners, um die Probe zu fixieren.
Legen Sie den Objektträger auf das Objektträgergestell in den Kunststoffwannenbehälter und färben Sie die Objektträger eine Minute lang mit der Gram-Färbung. Die Gram-Färbung erfordert, Tropfen der Färbung auf den Objektträger zu geben. Der Wannenbehälter fängt jede Färbung auf, die vom Objektträger abfällt. Die Färbung erleichtert die Betrachtung der Bakterien, und Sie können bestimmen, ob es sich um grampositive oder gramnegative Bakterien handelt.
Waschen Sie den Objektträger mit destilliertem Wasser. Waschen Sie den Objektträger mit 95%igem Ethylalkohol, um die Farbe von Bakterien mit dünnen Zellwänden zu entfernen. Spülen Sie erneut mit destilliertem Wasser.
Betrachten Sie den Objektträger unter dem Mikroskop. Grampositive Bakterien sind dunkelviolett mit dicken Zellwänden. Gramnegative Bakterien sind hellviolett mit dünnen Zellwänden. Stellen Sie sicher, dass Sie auch die Formen und Anzahlen der Bakterien notieren.
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