Gewebeproben für Immunhistochemie (IHC) vorbereiten: Ein umfassender Leitfaden

Immunhistochemie (IHC) ist ein mächtiges Werkzeug zur Diagnose von Krebs und anderen Krankheiten. Brusttumore werden routinemäßig mit IHC auf das Vorhandensein spezifischer Biomarker – Proteine – wie Östrogenrezeptoren ausgewertet, und Therapien werden gemäß den Ergebnissen entwickelt.

Gewebe

Tumorbiopsieproben können eingefroren oder in Paraffin eingebettet, in dünne Schnitte geschnitten und auf Objektträger gelegt werden. Blutkörperchen oder im Labor kultivierte Zelllinien können ebenfalls auf Objektträger zur Untersuchung gelegt werden. Die Proben werden mit Methanol oder Formaldehyd auf den Objektträgern fixiert.

Antikörper

Antikörper sind Teil der Körperabwehr gegen fremde Proteine, die auf einem Bakterium oder Virus vorhanden sind. Ein Antikörper ist spezifisch für ein einzelnes Protein; dieses Protein-Ziel wird als Antigen bezeichnet. Für die IHC bei Brustkrebs wurden kommerziell Antikörper entwickelt, die spezifisch für das Östrogenrezeptorprotein sind. Fixierte Brustbiopsieabschnitte werden in einer Lösung mit dem Östrogenrezeptor-Antikörper inkubiert, und wenn der Rezeptor vorhanden ist, bindet der Antikörper daran.

Visualisierung

Um die Antikörper sichtbar zu machen, werden sie mit Markern verknüpft, die das Gewebe färben können, wie Peroxidase (HRP), oder mit fluoreszierenden Markern wie grünem fluoreszierendem Protein. Die Objektträger können unter dem geeigneten Mikroskop betrachtet werden, und die Östrogenrezeptoren werden im Gewebe markiert, wenn sie vorhanden sind.