ELISA-Sensitivität: Verständnis ihrer Kraft in Forschung und Diagnostik
Der Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) bestimmt Konzentrationen von etwas innerhalb einer Probe, von Interleukinen (Chemikalien des Immunsystems), Proteinen, Antikörpern (wie bei HIV oder anderen Krankheiten). ELISA ist zuverlässig und genau, weshalb Forscher es in Forschungslaboren sowie für Patiententests verwenden. Seine Sensitivität macht es zu einem bevorzugten allgemeinen Werkzeug.
Antikörper-Sensitivität
Ganz wie Antikörper, die darauf ausgelegt sind, Bakterien und Krankheiten bei Menschen zu verfolgen, haften ELISA-Antikörper auf ähnliche Weise an das Probenziel (das Antigen).
ELISA ist sensibel, weil es Antikörper zur Detektion verwendet. Im Gegensatz zu einigen Medikamentenmolekülen, die verschiedene Zellen und Chemikalien außerhalb ihres Hauptziels ansprechen (schmutzige Medikamente), sind Antikörper wie Bluthunde mit einem noch stärkeren Geruchssinn. Sie konzentrieren sich nur auf ein bestimmtes Ziel. Wenn eine Person versucht, HIV-Antikörper in einer Blutprobe zu erkennen, würden die ELISA-Detektionsantikörper auf diese spezifischen Antikörper zusteuern und sich an sie heften. Ähnliche molekulare Strukturen täuschen sie in der Regel nicht.
Kontamination
Wie jeder Labortest können ELISAs falsch positive Ergebnisse liefern, wenn ein Kontaminationsproblem vorliegt.
ELISA ist auch empfindlich gegenüber Kontaminationsproblemen, weil der Test, wenn die Proben nur ein wenig durcheinandergebracht werden (z. B. hat der Forscher die gleiche Pipettenspitze für verschiedene Probenbrunnen verwendet), diese Kontamination erkennen und ein falsch positives Ergebnis für das eigentlich negative Proben liefern wird. Kontamination kann auch auftreten, wenn andere mit dem Test verbundene Reagenzien, wie die Wasch- oder Beschichtungspuffer, versehentlich etwas Probe in ihre Lösungen gemischt bekommen.
Inkubationszeiten
Ein weiterer Grund, warum ELISA sensibel sein kann, basiert auf der Inkubation. Je nach Protokoll ermöglicht die Inkubationsperiode den Antikörpern und der Probe Zeit, aneinander zu haften und in den Brunnen zu kleben. Wenn der Labormitarbeiter diesen Schritt zu sehr beeilt oder überspringt, kann die Menge der Probe, die an den Brunnen haftet, abnehmen, sodass nicht haftende Probe in den Waschschritten verworfen werden kann. In dieser Situation erhält der Techniker möglicherweise keine genaue Auslesung der betreffenden Probe.