Proteine sind Bestandteil jeder Zelle im Körper . Proteasen (auch als proteolytische Enzyme oder Proteasen bezeichnet) sind Verdauungsenzyme , deren Funktion es ist, Aufschlüsselung Proteine . Neben der Verdauung, sind auch Proteasen wichtig für die Blutgerinnung , Stoffwechselkontrolle und Immunregulation . Während der biochemischen Verfahren ( Katalyse) , Substrate zu binden, um aktive Stelle des Enzyms und in ein oder mehrere Produkte , die dann von dem Ort freigesetzt transformiert. Dieses Verfahren kann ergänzt oder gehemmt zu erhöhen oder zu verringern Reaktionen im Körper , je nach dem gewünschten Ergebnis. Labeling Substrat Produkte ermöglicht es Wissenschaftlern, die diese enzymatische Aktivität messen. Die Fluoreszenzmarkierung ist eine Technik verwendet, um bestimmte Moleküle zu färben, dass sie leichter zu verfolgen. Was Sie brauchen
Zielmolekül Cocktail
Fluoreszenzfarbstoff Labeling Kit
FluoreszenzleseInstrument
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Wie Beschriften Protease- Substrat- Produkte
1 < p > Wählen Sie Ihr Fluoreszenzfarbstoff . Gemeinsame Farbstoffe umfassen Rhodamin und Fluorescein . Diese können in der Regel von den Herstellern gekauft werden.
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Führen Sie die Reaktion und unbenutzt Fluorophor entfernen Zielmoleküle mit Hilfe Größenausschluss -Chromatographie ( ein Prozess, der trennt Moleküle nach ihrer Größe ) . Dye Removal Spalten sind auch häufig verwendet. Diese werden oft mit Beschriftungssätzebeworben .
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die Moleküle erkennen . Verwenden ein Fluoreszenzlesegerät, beispielsweise ein Fluoreszenzmikroskop . Licht einer bestimmten Wellenlänge wird durch das Molekül ( indirekt für einige Techniken ) übergeben , die Beleuchtung des Fluorophors.
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Nehmen Sie Ihre Messungen . Da Tests messen , wie viel Substrat entweder verbraucht oder die Produktmenge über einen Zeitraum freigesetzt , können Enzymmengen in Mol gemessen werden ( physikalische Größe ) oder in Enzymeinheiten ( Aktivität).
